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克倫特羅ELISA快速檢測方法

2011-09-05 10:46:04來源:互聯(lián)網作者:佚名瀏覽:次 分享:

  克倫特羅屬于β-興奮劑類藥物,可以提高脂肪型動物的瘦肉率和加速動物生長。8.3 當板間差異性大時,可能原因是板與板之間孵育時間相差太大,板與板之間洗滌不一致,移液槍使用不當,溫度不同等。

  克倫特羅屬于β-興奮劑類藥物,可以提高脂肪型動物的瘦肉率和加速動物生長。目前由于多起克倫特羅中毒事件且出現(xiàn)了死亡案例,因此被禁止使用。克倫特羅ELISA快速檢測試劑盒與經典色譜法相比,具有操作過程簡單、樣品處理快捷,可同時分析多個樣品,分析時間短、成本低、靈敏度高且對環(huán)境污染小等優(yōu)點。

  1 原理

  ELISA方法的基本原理是酶分子與抗體或抗體分子共價結合,此種結合不會改變抗體的免疫學特性,也不影響酶的生物學活性。此種酶標記抗體可與吸附在固相載體上的抗原或抗體發(fā)生特異性結合。

  2 試樣的準備

  2.1 對于尿樣可直接用于檢測,或者樣品比較渾濁時,可適當離心。當尿樣冷凍時,應將尿樣回溫再測。

  2.2 飼料樣品要按照說明書的處理步驟進行。當然,為保證樣品充分被提取,可適當延長渦旋時間、離心時間及離心轉數(shù)。

  3 試劑的準備

  3.1 不同批次的試劑盒不能混用,因為抗體和微孔板具有盒與批次的特異性。

  3.2 按試劑盒說明書的要求準備實驗中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗滌的應為新鮮的和高質量的。自配的緩沖液應用pH計測量較正。

  3.3 從冰箱中取出的實驗用試劑應待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次實驗不需用的部分應及時放回冰箱保存。

  3.4 檢測過程中應盡量保持室溫20~25℃,避免在通風口操作,溫度過低、過熱或蒸發(fā)都會影響檢測數(shù)據的準確性。同樣不應再陽光直射下實驗,防止過熱或蒸發(fā)帶來影響。

  4 加樣

  4.1 在ELISA中一般有4次加樣步聚,即加標本或樣品、酶結合物、底物、終止液。加樣時應將所加物加在板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產生氣泡,當有氣泡時可用干凈的槍頭小心刺破。

  4.2 加標準及樣品時一般用微量加樣器,按規(guī)定的量加入板孔中,每次加標本應更換吸嘴,以免發(fā)生交叉污染。

  4.3 在加酶標物、底物、終止液時,建議盡量使用多道移液槍,以縮短反應時間。尤其是酶標物和底物液用定量多道加液器,使加液過程迅速完成。當然,多道移液槍適合整板樣品的檢測,加酶標物、底物、終止液時可整瓶加入。如果只需要對少量樣品檢測時,加酶標物、底物、終止液動作一定要迅速、準確,避免槍頭碰壁或液體濺出。

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