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一、 前言
豬精液采集后，首先要評定公豬精液質(zhì)量，然后才能對精液進行進一步處理，以獲取高質(zhì)量的精液。處理精液以前，選擇能有效篩選精液的方法對提高豬場的繁殖性能是必要的。在最理想的情況下，在精液處理前對公豬的精液進行全面地評估，以鑒別出那些劣質(zhì)精液。對儲藏的精液，每天必須檢查總活動精子數(shù)和評估精子的外形;這樣，將可以確保用于人工授精的精液不被污染。因此，這篇文章的目的就是敘述公豬精液質(zhì)量的評定方法和說明哪些公豬的精液可以進入試驗室進行進一步處理。
二、密度
一般在評定公豬精液的質(zhì)量時應(yīng)檢測四個基本參數(shù)：精子密度、活力、外形和頂體完整性。其中，精子的密度和活力這兩個基本參數(shù)常在精液處理前篩選精液。原因是測定這兩個參數(shù)花費的時間最少，而且可以用它們來計算精液的稀釋倍數(shù)。
測定精液的濃度或精子的總數(shù)不僅是評定精液質(zhì)量的組成部分，更重要的是用來監(jiān)控公豬健康狀況和繁殖潛力;并且，它還是優(yōu)化個體遺傳潛力的主要考慮因素。正確的評定精液的質(zhì)量不只是增加公豬每次射精量和提高公豬舍的使用效率的唯一因素。精液質(zhì)量評定的目的是保證有足夠數(shù)量有活力的精子用于人工授精。
三、精子的活力
精液的活力是精液評定的一個重要方面。最近的一個研究表明：當(dāng)在采精后立即(少于24h)進行評定和輸精時，使用精子活力低于62.5%，產(chǎn)仔數(shù)/產(chǎn)仔率將下降。然而，由于商用種公豬的精液很少會在這么短時間內(nèi)使用，所以，一般精液都經(jīng)過處理后才輸送到母豬場使用。精液經(jīng)過儲存后，它的活力會下降。所以在評定種公豬精液時，活力最小值應(yīng)大于60%。許多種公豬站制定了精子活力在70~80%之間的篩選標(biāo)準(zhǔn)。精液經(jīng)過實驗室處理后活力最小值應(yīng)根據(jù)使用前計劃儲存時間和在這段儲存時間內(nèi)的預(yù)期活力下降而定。并且，種公豬站必須考慮精液儲存條件和處理精液的能力比公豬站差這一點�？紤]公豬站與母豬場之間精液輸送的差異將有助于公豬站選擇初活力的接受水平以確保輸送精液的精子活力在60.0%以上。
通過顯微鏡從視覺上估計精子活力的方法應(yīng)用最廣泛。技能和經(jīng)驗對結(jié)果準(zhǔn)確性有一定的影響。簡而言之，在溫?zé)岬妮d玻片上放置一小滴精液稀釋液(所有的評估中精液的稀釋率必須統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn))，然后蓋上蓋玻片。樣本稀釋到用400倍的物鏡足以觀察全部精子細(xì)胞，總體的估計來自觀察的精子群。這樣，應(yīng)首先對實驗員進行培訓(xùn)。這種培訓(xùn)首先要求實驗員對總體精子活力進行估計，然后實驗員用顯微鏡計算在5個區(qū)域內(nèi)10個單元格的精子總數(shù)和有活力的精子占總精子的百分?jǐn)?shù)，以驗證精子總活力。
四、外形
精子的外形和頂體完整同樣對精子的生存力有影響。就估計精液質(zhì)量而言，評定精子外形比評定精子活力更能體現(xiàn)精液質(zhì)量。這兩個參數(shù)和精子活力在精液質(zhì)量評定時都至關(guān)重要。它們一起決定精液的取、舍。
運動的精子可能外形上不正常；但是，運動力低的精子可能受精。然而，沒有頂體的精子不可能受精。用這三個參數(shù)標(biāo)準(zhǔn)評定精液質(zhì)量就很可能低估了精液真正的受精能力和公豬精液質(zhì)量。
正如精子的活力，精子的外形評定表明：在使用人工授精時，需要一個確定正常精子外形百分?jǐn)?shù)提高母豬繁殖率。研究資料還表明：精子常規(guī)評定使用的是外形這個參數(shù)。如果是使用精液，那么正常形態(tài)精子百分?jǐn)?shù)小于70%的精液應(yīng)認(rèn)為是劣質(zhì)精液。由于正常形態(tài)精子百分?jǐn)?shù)在儲存期將減少，而且由于在公豬個體間差異較大。所以，當(dāng)使用長期儲存(>24h)的精液時;最初處理的精液的正常形態(tài)的精子百分?jǐn)?shù)要達在70%以上。
在檢查精子活力同時可以粗略地對精子外形進行評定。然而，理想的外形檢測要使用顯微鏡，它能區(qū)分精子的各個部分。精確地評定精子的外形是通過分別計算正常精子頭部、微滴和尾部數(shù)。吸取1-2滴精液按1：10與稀釋劑混合，使用顯微鏡(400倍或1000倍)觀察，外形百分?jǐn)?shù)可以直接計算出來。如果精液不可能立即被檢測(<30分鐘)，應(yīng)先用0.5-1毫升生理鹽水固定或保存在載玻片上。除了保存樣品，精子同時被固定。因此，更容易觀察。可以觀察濕的樣本或者制成干的固定的標(biāo)本再進行觀察。頭部、尾部和胞質(zhì)畸形的精子計為不正常的精子。盡管有近端小滴(靠近頭部)的精子對精液質(zhì)量評定的影響較小。然而，當(dāng)近端小滴迅速增加時，用產(chǎn)仔率和產(chǎn)仔數(shù)來衡量的繁殖力將逐漸降低。在采集的精液中末端微滴比近端小滴更易被發(fā)現(xiàn)，末端小滴的影響似乎與近端小滴一樣。盡管一些資料認(rèn)為公豬精液細(xì)胞質(zhì)微滴的影響是有限的。
五、頂體完整性
頂體膜覆蓋精子頭部的三分之二，它含有穿透卵母細(xì)胞所必需的酶。頂體完整性的評定很費時,需要比較先進的顯微鏡，并且要有熟練地操作技能。一些研究表明：頂體完整性比精子的活力在評定精子質(zhì)量方面更具有代表性。頂體完整性檢查與精子外形檢查的方法一樣。然而，在檢測單個精子細(xì)胞時應(yīng)該先把載玻片放在顯微鏡下，然后觀察精子頂體層的差別。頂體完整率小于51%的精液認(rèn)定為劣質(zhì)的精液，即使精液的受精率可能是處于同一水平。頂體的完整性評定使用與活力和形態(tài)學(xué)評定一樣的原理。當(dāng)精液被長期保存時，正常頂體百分?jǐn)?shù)小于51%精液的受胎率可能很低�；盍�，外形，或頂體完整性的評定乎并不能完全估計繁殖力，但是它卻是精子生存能力的基本表現(xiàn)。與公豬的射精能力預(yù)測產(chǎn)仔數(shù)和受胎率相比，以上所述的估計方法是通過消滅劣質(zhì)的精液來影響受胎率和產(chǎn)仔數(shù)。
在外觀評定中使用染色劑
粗略地外觀評定單個公豬精液是必需的;然而，定期詳細(xì)地檢測可能提供了一種有效質(zhì)量監(jiān)控方法，以確保精液粗略地評定是否與精液真實外觀質(zhì)量相符。詳細(xì)地外觀評定要使用顯微鏡，有時需要使用染色劑對精子細(xì)胞進行染色。與總外形檢測相比，它在高倍鏡頭(1000x：油浸)下對單個精子細(xì)胞進行檢測。詳細(xì)地外形檢測時，頭部、中部和尾部應(yīng)分開計算。首先曙紅染色劑(商用外形染色劑)與精液按1：1混合制成載玻片涂片。這樣就能充分區(qū)分精子頭部形態(tài)的微小差別。通常是計算100個總精子細(xì)胞，然后計算出正常精子細(xì)胞所占百分?jǐn)?shù)，其它在外觀檢查使用的染色劑有：精子頭部染色威廉士染色劑、頂體染色的萘酚黃和紅霉素染色劑。
外觀，顏色和氣味
盡管顯微鏡評定是取、舍公豬精液的標(biāo)準(zhǔn);但是，明顯的視覺和嗅覺特性是精液品質(zhì)的象征。正常公豬精液必須具有可觀的體積(>150毫升)，并且是乳白色的就像脫脂乳。精液中偶而帶少量的血，這些血通常是來自尿道，使精液略帶黃色。
采集到的精液決不能有明顯的異味,如果有，很可能是精液采集過程中衛(wèi)生環(huán)境差;也可能是精液采集過程存在不規(guī)則地波爾人衛(wèi)生流程。散發(fā)的氣味很可能就是包皮分泌液的反映(尿)，包皮分泌液通常滿載大量的細(xì)菌和外來的污染物。在精液稀釋液中使用抗生素可以在精液貯存期間控制病原體的生長，并不能大大地減少和防止采精時的細(xì)菌污染。所以，必須檢查精液有無異味，并且一旦發(fā)現(xiàn)精液有異味就應(yīng)廢棄。此外、在大多數(shù)的公豬場應(yīng)有例行的周期性輸精培訓(xùn)。細(xì)菌能夠在較差的環(huán)境條件下大量繁殖，并且能在實驗室進行檢測。雖然用于輸精的精液幾乎不可避免會帶有細(xì)菌;但是，還極少有關(guān)于細(xì)菌形狀、含量與繁殖力之間關(guān)系的報道。然而，由于細(xì)菌污染與精液的保存時間減少、精液凝集以及子宮傳染性有關(guān)。所以，應(yīng)定期地檢驗精液中的細(xì)菌污染，鑒定污染源以減少精液的污染。表2.列舉在公豬精液中發(fā)現(xiàn)一些較常見的細(xì)菌以及可能的起源。
溫度刺激和凝集
精液在收集后并不是直接輸送到實驗室(即在畜舍和實驗室或儲存庫之間輸送)，考慮溫度波動對精子的影響這一點是非常重要的�？焖俚亟禍貢䦟�(dǎo)致精子的冷休克。當(dāng)在顯微鏡下觀察，這種現(xiàn)象很明顯;有些精子尾部纏繞著頭部卷曲或緊緊地盤旋在精子頭部之下。通過顯微鏡觀察，一般的精子可以正常地存在于精液中;然而，當(dāng)溫度小于32℃時超過10%尾部卷曲的精子明顯顯示出冷休克現(xiàn)象。但是，我們不應(yīng)丟棄這些精液，應(yīng)該考慮用稀釋劑直接的稀釋(原因是在同樣的溫度以防止更進一步損害)。
很多資料表明精液凝集對繁殖力有一定的影響。 原因是凝塊中的精子細(xì)胞是不能動的。也許是由于精子細(xì)胞在穿過睪丸時已損害或者伴隨射精而損傷。精液凝集的其它原因可能包括在運輸時溫度變化范圍過大和細(xì)菌污染。
當(dāng)計算精子密度時，考慮實際凝集度相當(dāng)重要，即使極少有精液凝塊影響繁殖力的報道。然而，當(dāng)用分光光度計檢測稀釋精液或用血球計計算精子時，可能會低估有活力的精子數(shù)。在顯微鏡下觀察，有時可以看見精子在凝塊內(nèi)部運動;然而，沒有充分的證據(jù)證明這些精子細(xì)胞在受精后會分開。所以，不管凝塊外觀上的運動性如何，都應(yīng)根據(jù)出現(xiàn)精液凝塊的百分?jǐn)?shù)以校準(zhǔn)計算整個精子數(shù)。精液中的凝塊可能與公豬、公豬與精液稀釋劑相互作用以及精液管理有關(guān)。
小結(jié)
精液質(zhì)量參數(shù)的正常值和最小值。最重要的是記住那些難以精確地檢測的外形上的和難以接近絕對值度量的頂體參數(shù)值。精子傾向性和樣本標(biāo)本滑動可能會明顯地影響精子的計數(shù)。比如，只有當(dāng)精子平放在顯微鏡載玻片上時，頂體才能被看見。我們提供一種與其它的評估公豬精液潛在的授精能力同樣好的方法。符合公豬精液品質(zhì)評定中的一個或一個以上質(zhì)量參數(shù)的精液不能完全地確保的是優(yōu)質(zhì)的精液。由于在母豬場輸送劣質(zhì)精液引起繁殖性能降低最終歸結(jié)來源的精液。
