摘 要:重慶某豬場(chǎng)發(fā)生以發(fā)燒、呼吸困難、關(guān)節(jié)腫脹為主要癥狀的疫情,給豬場(chǎng)造成了很大損失,通過(guò)現(xiàn)場(chǎng)診斷和實(shí)驗(yàn)室病原學(xué)檢測(cè),確診為豬圓環(huán)病毒、巴氏桿菌及副豬嗜血桿菌混合感染。經(jīng)藥敏試驗(yàn)篩選出丁胺卡那霉素等敏感藥物,采取以控制細(xì)菌感染為主的綜合措施控制了疫情。
2007年9月,重慶某豬場(chǎng)持續(xù)發(fā)生以發(fā)熱、呼吸困難、關(guān)節(jié)腫脹為主要特征的疫情,豬場(chǎng)按各公司推薦的多種針對(duì)“高熱病”的藥物和方案進(jìn)行處理,病情未得到控制,最后通過(guò)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行病原檢測(cè),確診為豬圓環(huán)病毒、豬巴氏桿菌及副豬嗜血桿菌混合感染,經(jīng)篩選敏感藥物以采取針對(duì)性的綜合防控措施控制了疫情。
1 發(fā)病情況
2007年9月初,重慶某規(guī);i場(chǎng)哺乳仔豬和保育階段的小豬持續(xù)發(fā)生以體溫升高、呼吸困難、皮膚發(fā)紅或蒼白、厭食、消瘦、嗜睡和神經(jīng)癥狀、下痢、關(guān)節(jié)腫脹、跛行為特征的疫病,豬場(chǎng)先后按多家飼料公司、獸藥廠技術(shù)員推薦的豬“高熱病”治療藥物和控制方案進(jìn)行處理,用過(guò)治療呼吸道疾病的氟苯尼考、林可霉素、阿莫西林、鏈霉素、土霉素、慶大霉素、黃芪多糖等藥物,用藥后病情時(shí)好時(shí)差,效果不明顯,該病發(fā)病率達(dá)50%以上,病死率達(dá)30%~50%。
2 臨床表現(xiàn)
病豬精神沉郁,體溫升高達(dá)40 ℃~41.5 ℃,呼吸困難,流漿液性鼻液、食欲減退,身體極度消瘦、被毛粗亂無(wú)光呈“毛毛豬”,耳部、四肢及腹部皮膚明顯發(fā)紅,少數(shù)皮膚異常蒼白或發(fā)黃,拉黃色稀糞和茶色尿;站立困難、跛行或蹲伏不動(dòng)、腕關(guān)節(jié)和跗關(guān)節(jié)明顯腫脹;部分豬有轉(zhuǎn)圈、四肢劃水狀運(yùn)動(dòng)等神經(jīng)癥狀,觸摸腹股溝淋巴結(jié)腫大。
3 剖檢病變
淋巴結(jié)腫大,尤其是腹股溝淋巴結(jié)腫大明顯,切面出血或灰白色;心包有大量淡黃色透明液體,部分腹腔充滿淡黃色腹水,纖維素性胸膜炎和纖維素性腹膜炎,腹腔黏附較厚的白色纖維素性滲出物;肺有充血、出血或蒼白萎縮,間質(zhì)增寬;肝臟腫大易脆,脾臟腫大、邊緣有小鋸齒狀突起,腎腫腫大出血有白色壞死灶,膀胱內(nèi)潴留茶色尿液,膀胱底部和胃底部有不同程度充血,腕關(guān)節(jié)和跗關(guān)節(jié)腫大發(fā)紅,關(guān)節(jié)腔內(nèi)有透明膠凍樣液體;扁桃體充血,腦膜充血、出血。
4 實(shí)驗(yàn)室診斷
4.1 細(xì)菌學(xué)診斷
4.1.1 直接涂片觀察 無(wú)菌取病豬的心、肝、脾、肺、腎臟、淋巴結(jié)、心包液、腹水和關(guān)節(jié)液直接涂片,經(jīng)革蘭氏染色,鏡下可見(jiàn)有兩種革蘭氏陰性細(xì)菌,一種呈現(xiàn)明顯兩極染色的球桿菌,另一種為大小不等,短小桿狀、球桿形、絲狀等多種不同形態(tài)細(xì)菌。肺、腎、脾和心包液細(xì)菌數(shù)量相對(duì)較多。
4.1.2 細(xì)菌分離鑒定 無(wú)菌取剖檢病豬的心、肝、脾、肺和腎接種于鮮血瓊脂平板和巧克力平板,在37 ℃培養(yǎng)觀察,24 h后在兩種平板上均可見(jiàn)到光滑、圓形,邊緣整齊的白色菌落,不溶血,革蘭氏染色陰性,兩極濃染的球桿菌,經(jīng)生化鑒定為巴氏桿菌。繼續(xù)培養(yǎng)48 h后在兩種平板上又長(zhǎng)出另一種邊緣整齊、圓形透明、針尖大小的菌落,沒(méi)有溶血現(xiàn)象,染色可見(jiàn)短小桿狀、球桿形、絲狀等不同形態(tài)的細(xì)菌,進(jìn)行生化鑒定為副豬嗜血桿菌。
4.1.3 動(dòng)物試驗(yàn) 將兩種細(xì)菌用TSB肉湯增菌培養(yǎng),各取0.5 mL腹部皮下接種2只小鼠,小鼠于10 h左右開(kāi)始發(fā)病,表現(xiàn)為弓背彎腰,被毛豎立,呼吸困難,腹部扇動(dòng)劇烈。接種巴氏桿菌的小鼠有1只于接種后10 h死亡,另1只于接種后24 h死亡;接種副豬嗜血桿菌組均在接種后48 h死亡,從死亡小鼠肝臟觸片和分離培養(yǎng)物中均可見(jiàn)到大量細(xì)菌。
4.2 藥敏試驗(yàn)
將兩種細(xì)菌液分別涂布于巧克力瓊脂平板,以紙片法進(jìn)行藥敏感試驗(yàn),藥敏試驗(yàn)的藥物包括氟苯尼考、丁胺卡那霉素、紅霉素、頭孢噻呋鈉、氟哌酸、氨芐青霉素、卡那霉素、慶大霉素、環(huán)丙沙星、氧氟沙星、強(qiáng)力霉素、四環(huán)素、復(fù)方新諾明、先鋒Ⅴ等14種。結(jié)果表明,巴氏桿菌對(duì)丁胺卡那霉素高度敏感,對(duì)氧氟沙星、環(huán)丙沙星、先鋒Ⅴ中度敏感,對(duì)其他9種藥不敏感;副豬嗜血桿菌對(duì)丁胺卡那霉素、頭孢噻呋鈉高度敏感,對(duì)氧氟沙星、環(huán)丙沙星中敏,對(duì)其他10種藥不敏感。
4.3 病毒的檢測(cè)
用IDXXX公司的ELISA試劑盒檢測(cè)10頭發(fā)病豬血清,豬瘟強(qiáng)毒陰性(0/10),gEELISA檢測(cè)豬偽狂犬病強(qiáng)毒抗體陰性(0/10),有5份血清為豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)抗體陽(yáng)性(5/10);取3頭癥狀典型病豬的肺臟、淋巴結(jié)和脾抽提核酸用RTPCR檢測(cè)豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)全部為陰性。
4.4 弓形蟲(chóng)和附紅細(xì)胞體的檢測(cè)
取病豬的肝、脾、肺臟和淋巴結(jié)做成涂片,用姬姆薩和瑞氏染色,于油鏡下觀察,未見(jiàn)弓形蟲(chóng)。取病豬耳靜脈血1滴于載玻片上,加等量生理鹽水稀釋后,蓋上蓋玻片,在顯微鏡下沒(méi)有發(fā)現(xiàn)附紅細(xì)胞體。
根據(jù)以上臨診斷癥狀、剖檢病變和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果,綜合判定該豬場(chǎng)發(fā)病是由豬圓環(huán)病毒2型、巴氏桿菌和副豬嗜血桿菌混合感染引起。
5 治療措施
5.1 注射給藥
立即隔離發(fā)病豬和疑似發(fā)病豬,肌肉注射組合藥物(干擾素+清開(kāi)靈注射液+丁氨卡那霉素+氨基比林+維生素C),連續(xù)用4 d~5 d;對(duì)關(guān)節(jié)腫脹嚴(yán)重的豬用組合藥物(丁氨卡那霉素+氨基比林+維生素C+地塞米松)直接注射到關(guān)節(jié)腔內(nèi),連用3 d;飲水中加入氧氟沙星或環(huán)丙沙星,電解多維等讓豬自由飲用。
5.2 飼料加藥
在每噸飼料中添加藥物(金霉素300 g+支原凈125 g+磺胺間甲氧嘧啶500 g+小蘇打500 g+黃芪多糖500 g),全群飼喂10 d。
5.3 飲水給藥
給豬清潔飲水,在水中加入氧氟沙星或環(huán)丙沙星,電解多維等讓豬自由飲用。
5.4 加強(qiáng)環(huán)境消毒和飼養(yǎng)管理
在發(fā)病期間堅(jiān)持1 d消毒1次,同時(shí)保持圈舍通風(fēng),適當(dāng)降低飼養(yǎng)密度,減少應(yīng)激。
病豬經(jīng)治療處理后第3天明顯好轉(zhuǎn),1周后控制了疫情。
6 小結(jié)
我國(guó)許多養(yǎng)豬場(chǎng)環(huán)境污染嚴(yán)重,豬病非常復(fù)雜,以多病原混合感染和繼發(fā)感染為主[1],豬場(chǎng)濫用抗生素導(dǎo)致許多病原性細(xì)菌已產(chǎn)生廣泛耐藥性,發(fā)病后用藥效果不理想。診斷豬病要結(jié)合流行病學(xué)、臨床癥狀、剖檢病變以及實(shí)驗(yàn)室診斷進(jìn)行綜合判定才能確診,否則只會(huì)誤診和漏診,導(dǎo)致延誤治療時(shí)機(jī)和加大損失。本次疫情通過(guò)全面診斷尤其是借助實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù),準(zhǔn)確弄清了發(fā)病原因?yàn)樨i圓環(huán)病毒2型、巴氏桿菌和副豬嗜血桿菌混合感染引起,采取針對(duì)性控制措施取得很好效果。
豬圓環(huán)病毒是一種免疫抑制性病原,可導(dǎo)致免疫失敗和繼發(fā)多種細(xì)菌感染,是引起斷奶仔豬發(fā)生多系統(tǒng)衰竭綜合征的主要病原,在我國(guó)豬場(chǎng)感染非常普遍,例如在2006年發(fā)生豬“高熱病”的很多豬場(chǎng)都分離到該病毒[2]。該病還沒(méi)有理想的疫苗用于預(yù)防,據(jù)報(bào)道一些豬場(chǎng)采用自家組織滅活疫苗有一定的控制效果,但制作和使用自家苗一定要慎重和按相關(guān)規(guī)定操作,否則可能給豬場(chǎng)帶來(lái)新的問(wèn)題[3]。當(dāng)豬群感染圓環(huán)病毒時(shí)主要采取以控制細(xì)菌繼發(fā)感染為主的治療方案[4],如本次分離到的巴氏桿菌與副豬嗜血桿菌對(duì)小鼠具有很強(qiáng)致死性,顯然是引起豬大量死亡的最主要原因,通過(guò)篩選敏感藥物進(jìn)行治療效果非常明顯。為了防控豬圓環(huán)病毒給豬場(chǎng)造成更大損失,平時(shí)一定要加強(qiáng)飼養(yǎng)管理、減少豬群應(yīng)激、加強(qiáng)生物安全措施、搞好重大豬病如豬瘟、豬偽狂犬病等的免疫接種和抗體監(jiān)測(cè)等工作[56]。[FS:PAGE]