摘 要:豬滲出性皮炎是由豬葡萄球菌引起豬的出現(xiàn)全身油脂樣滲出、形成皮痂并脫落,甚至導(dǎo)致脫水和死亡等臨床癥狀的一種急性傳染病。論文綜述了近年來有關(guān)豬滲出性皮炎的病原學(xué)、流行病學(xué)和致病機(jī)理方面的研究結(jié)果,并就豬滲出性皮炎的診斷和防治進(jìn)行了簡要介紹。
關(guān)鍵詞:豬葡萄球菌;致病機(jī)理;防治
豬滲出性皮炎(Exudative epidermitis,EE)主要由豬葡萄球菌(Staphylococcus hyicus)引起[1]。豬葡萄球菌為革蘭氏陽性、條件致病菌,常寄居于皮膚、黏膜上,當(dāng)動(dòng)物機(jī)體的抵抗力降低或皮膚、黏膜破損時(shí),病菌便乘虛而入。滲出性皮炎的臨床癥狀被認(rèn)識已有160多年。
S.hyicus起先被Sompolinsky描述為微球菌,現(xiàn)已被確定為一種葡萄球菌。從分類上將S.hyicus確定為導(dǎo)致豬滲出性皮炎的病原[1]。該菌對生長條件要求不高,可以在普通的瓊脂板上生長,也可以在選擇性指示培養(yǎng)基上生長。S.hyicus還可以在含50 mL/L牛血清瓊脂板上生長,其在血平板上長成光滑、灰白色、直徑大約為3 mm~4 mm的菌落,常呈不規(guī)則成堆排列,形似葡萄串狀。脂酶試驗(yàn)為陽性,在血瓊脂板上沒有溶血現(xiàn)象[2],透明質(zhì)酸酶陽性[3],熱穩(wěn)定性、DNA酶陽性[4],接觸酶陽性,VP試驗(yàn)陰性,氧化酶陰性[5]。糖發(fā)酵中果糖、葡萄糖、乳糖和蔗糖等為陽性,麥芽糖、甘露醇、木糖等為陰性[6]。這些生化特性在常規(guī)方法中區(qū)分該病和其他來源于葡萄球菌時(shí)非常有用[2]。
S.hyicus可以產(chǎn)生幾種不同的表皮脫落毒素,根據(jù)其抗原性的不同,分別命名為ExhA、ExhB、 ExhC和ExhD并進(jìn)行分型[7]。不同的血清型毒株,毒力和致病力存在差異,但其生化和培養(yǎng)特性基本一致。強(qiáng)毒株常能引起仔豬皮膚油脂樣滲出、形成皮痂并脫落,嚴(yán)重時(shí)導(dǎo)致脫水和死亡等臨床癥狀。此外,S.hyicus流行還有明顯的特點(diǎn),血清型ExhB最為流行,其次分別是血清型ExhA、ExhC和ExhD[7] 。
葡萄球菌對環(huán)境的抵抗力較強(qiáng),在干燥的膿汁或血液中可以存活2月~3月,80 ℃條件下30 min才能殺滅,但煮沸可迅速使其死亡。葡萄球菌對消毒劑的抵抗力不強(qiáng),一般的消毒劑均可殺滅。對磺胺類、青霉素、紅霉素等抗菌藥物較敏感,但易產(chǎn)生耐藥性。
1 流行病學(xué)
S.hyicus是豬常見的一種共棲菌,經(jīng)?蓮慕】地i鼻黏膜、結(jié)膜、耳朵或鼻、口部皮膚以及在小母豬和母豬的生殖道內(nèi)分離到該菌[6],當(dāng)飼養(yǎng)環(huán)境發(fā)生變化時(shí)或引起免疫抑制的因素(轉(zhuǎn)群、斷奶、混群飼料突然改變或通風(fēng)不良、免疫抑制性疾病)存在時(shí),會(huì)導(dǎo)致該病的發(fā)生。
S.hyicus的發(fā)生和流行無明顯的季節(jié)性,一年四季均有發(fā)生。該病在豬群中一般呈散發(fā)性,病死率低,發(fā)病率一般在2%~5%之間,某些環(huán)境衛(wèi)生差的豬場發(fā)病率能達(dá)到10%左右,但在沒有免疫力的豬群中病死率可達(dá)到70%。該病痊愈后嚴(yán)重影響仔豬的生長速度,造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。該病主要感染1周齡~5周齡的仔豬,但強(qiáng)毒株也能造成更大的豬發(fā)病。仔豬出生時(shí)可通過母豬生殖道感染,當(dāng)飼養(yǎng)環(huán)境變化時(shí)特別是皮膚損傷時(shí)更容易感染發(fā)病。仔豬感染后首先是感染部位發(fā)生紅斑,然后有皮脂樣滲出,隨之發(fā)展至全身,最后形成皮痂并脫落。該菌常被看成是一種繼發(fā)性病原菌,有研究表明,豬群中存在圓環(huán)病毒2型感染時(shí),S.hyicus的分離率會(huì)增加[8]。在有其他疾病如PRRSV、豬瘟以及豬偽狂犬病毒等感染時(shí),可以加劇臨床癥狀。
S.hyicus對不利的條件具有很強(qiáng)的抵抗力,并能在環(huán)境中存活很長時(shí)間。帶菌豬是該病的主要傳染源,該病原菌的傳播可能是通過直接皮膚接觸,間接接觸污染的墻壁和用具,該菌在感染豬舍空氣中濃度可達(dá)2.5×104/m3,表明該菌可以通過空氣傳播。
2 發(fā)病機(jī)理
S.hyicus可分為有毒力和無毒力菌株,把有毒力的S.hyicus的純培養(yǎng)物接種于無免疫力豬的劃痕皮膚上能夠復(fù)制該病,通過皮下注射于SPF小豬也能復(fù)制成功[1]。普通豬有可能對這種處理有抵抗力,表明免疫作用可能是重要的保護(hù)因素。
發(fā)病機(jī)理中最重要的因素可能是產(chǎn)生表皮脫落毒素,其屬于一種外毒素,分子質(zhì)量約為30 ku,被認(rèn)為是一種熱不穩(wěn)定蛋白[9]。S.hyicus可以產(chǎn)生幾種不同的外毒素,根據(jù)其抗原性不同[10],分別命名為ExhA、ExhB、ExhC和ExhD[7],四者均為金屬蛋白。在該菌液體培養(yǎng)物上清液中存在表皮脫落毒素,先后用其粗制品或純化物,給仔豬局部皮下注射,成功復(fù)制出臨床EE所見的皮膚病變。據(jù)報(bào)道,從患有滲出性皮炎的豬分離到S.hyicus的幾率是100%,然而從健康的豬群中分離的幾率只有35.4%,但兩者的生化和培養(yǎng)特性都是一樣的。S.hyicus的培養(yǎng)濾液中有可以導(dǎo)致仔豬發(fā)生滲出性皮炎的外毒素[11]。從發(fā)病和健康豬分離菌株的培養(yǎng)上清液可以使1日齡雛雞的表皮脫落。因此從患病和健康豬分離的S.hyicus都能產(chǎn)生毒素,從患病豬和健康豬分離到的菌株產(chǎn)生毒素的幾率分別為87.5%和76.1%。用能產(chǎn)生毒素和不能產(chǎn)生毒素的菌株做攻毒試驗(yàn)進(jìn)行觀察,接種不能產(chǎn)生毒素的菌株,在接種部位可以觀察到紅斑并在48 h內(nèi)消失,但接種產(chǎn)生毒素的菌株,直到接種后7 d還沒有消失。在接種產(chǎn)生毒素菌株的仔豬中可以觀察到典型的臨床癥狀,如油脂樣滲出、形成皮痂和表皮脫落[6]甚至脫水死亡。S.hyicus在皮膚里大量存在,并可從局部淋巴結(jié)和流出的血液中分離到。毒素使表皮中的細(xì)胞分離,特別是使上部的棘細(xì)胞層的細(xì)胞分離,從而使細(xì)菌在表皮內(nèi)迅速擴(kuò)散并浸入深層,造成表皮脫落常伴有大量的皮脂分泌物和漿液滲出物,最終導(dǎo)致脫水或因敗血癥而死亡,表明表皮脫落毒素是造成皮膚病變和脫落的主要因子之一。
滲出性皮炎與人的葡萄球菌性鱗片狀皮膚綜合征(SSSS)具有很多相同之處。兩者主要分別感染小豬和新生兒,可導(dǎo)致局部或全身性的表皮脫落,并排出大量皮脂性分泌物。兩者主要是由毒素引起,并具有相似組織病理學(xué)變化。人的葡萄球菌性鱗片狀皮膚綜合征由金黃色葡萄球菌引起,該菌產(chǎn)生兩個(gè)不同型的毒素,即ETA和ETB,被認(rèn)為是造成表皮脫落的主要因子之一。
3 診斷
豬滲出性皮炎的初步診斷可以根據(jù)臨床癥狀、動(dòng)物年齡和眼觀的病理變化來判斷。確診必須經(jīng)過實(shí)驗(yàn)室診斷。
3.1 細(xì)菌學(xué)檢查
對疑似病例,無菌條件下采取患病小豬的皮膚、淋巴結(jié)和臟器直接涂片后用革蘭氏染色,鏡檢看到葡萄狀的陽性球菌,可以初步判斷。無菌條件下接種于血平板或普通肉湯37 ℃培養(yǎng)18 h~24 h,挑取可疑菌落涂片,染色后鏡檢。也可以采用選擇性指示瓊脂,這樣可使從病料中分離S.hyicus變得容易[2]。
3.2 血清學(xué)診斷
通過制備表皮脫落毒素的單克隆和多克隆血清來做血清學(xué)試驗(yàn)。如凝集試驗(yàn),可以用玻片法將含有標(biāo)準(zhǔn)的單克隆血清與待檢菌各1滴在玻片上混合,觀察是否凝集。免疫擴(kuò)散試驗(yàn),周圍的孔加入待檢菌液,中央孔加入標(biāo)準(zhǔn)血清,觀察是否有沉淀帶產(chǎn)生。還可以用ELISA法[12],挑取待檢單個(gè)菌落,在液體培養(yǎng)基里培養(yǎng)過夜,然后取上清液并用標(biāo)準(zhǔn)抗原作為陽性對照,制好的ELISA板置于4℃過夜,然后加入標(biāo)準(zhǔn)的陽性單抗血清作為一抗,接著加入二抗最后加底物顯色。免疫印跡法,挑取待檢單個(gè)菌落在液體培養(yǎng)基里培養(yǎng)過夜,然后取上清液采用聚丙烯酰胺凝膠電泳,隨后加入一抗(標(biāo)準(zhǔn)陽性血清)和二抗顯色[7]。用PCR診斷方法,可做快速診斷,而且具有很高的靈敏度。也可以用多重PCR檢測幾種不同的表皮脫落毒素的葡萄球菌進(jìn)行檢測和分型[13]。
4 防治
4.1 加強(qiáng)飼養(yǎng)管理
S.hyicus是一般被認(rèn)為是條件性致病菌。因此加強(qiáng)豬群飼養(yǎng)管理, 特別是仔豬出生、斷奶時(shí)的管理, 合理搭配飼料以增強(qiáng)抵抗力。同時(shí)要搞好環(huán)境衛(wèi)生, 對豬體、圈舍、場地定期徹底消毒, 殺滅病源[14]。
4.2 預(yù)防接種
免疫預(yù)防是控制傳染病的有效手段,研制能預(yù)防豬葡萄球菌的疫苗是成功預(yù)防該病的關(guān)鍵。到目前為止還沒有正規(guī)疫苗生產(chǎn),自制滅活菌苗預(yù)防是最好的辦法。從具有明顯臨床癥狀的病豬分離S.hyicus培養(yǎng)制成滅活苗免疫可取得滿意的效果。S.hyicus產(chǎn)生的表皮脫落毒素可能是惟一的保護(hù)性抗原,所以提取豬葡萄球菌產(chǎn)生的表皮脫落毒素進(jìn)行滅活制成滅活苗免疫,其產(chǎn)生的抗體能有效中和表皮脫落毒素對皮膚的侵害,同樣能取得良好的效果,對規(guī);i場預(yù)防本病的發(fā)生和流行起到了重要作用[15]。
4.3 治療
該病越早治療效果越好,嚴(yán)重感染的動(dòng)物則可能不見效[16]。根據(jù)臨床試驗(yàn),采取對癥治療,抗菌消炎、抗病毒感染等措施都有良好的效果。全身性治療可降低皮膚病變的程度,使病變僅發(fā)生淺層,并可促進(jìn)愈合過程。S.hyicus經(jīng)常能產(chǎn)生耐藥性,所以根據(jù)藥物敏感試驗(yàn)指導(dǎo)給藥。對其有效的藥物有聯(lián)合使用三甲氧芐二氨嘧啶、磺胺或林可霉素、壯觀霉素等。用以上藥物進(jìn)行體內(nèi)外結(jié)合治療該病都有良好的效果。